蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即Western blot,是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF膜上，然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术，现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究。

通过抗原抗体反应对目标蛋白的表达进行半定量检测，还用于蛋白-蛋白、蛋白-DNA的相互作用的后续分析。利用抗原抗体反应，检测样本中目的蛋白表达量；检测基因蛋白表达量最常用的方法，半定量，无法提供基因的细胞定位等信息。

Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的各蛋白成分。

WB一般步骤：蛋白质抽提，蛋白质定量，变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳（SDS-PAGE），蛋白质转移，Western blot膜的封闭和抗体孵育，Western blot结果检测，Western blot数据分析。